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细胞STR鉴定检测服务

更新时间:2021-10-19

访问量:684

厂商性质:代理商

生产地址:上海

简要描述:
细胞STR鉴定检测服务
送样要求:
1.基因组DNA: OD 260/280 在1.8~2.0之间, 浓度≥50ng/μl,体积≥20μl;
组织块:介于绿豆粒~黄豆粒大小之间即可
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送样要求:

1. 基因组DNA: OD 260/280 在1.8~2.0之间, 浓度≥50ng/μl,体积≥20μl;

2. 组织块:介于绿豆粒~黄豆粒大小之间即可,

3. 新鲜细胞:(1)细胞数≥106;(2)贴壁细胞经胰蛋白酶消化后,离心收集细胞沉淀;(3)悬浮细胞直接离心收集细胞沉淀;(4)PBS清洗细胞沉淀,尽可能去除培养基与胰酶;

4. 冻存细胞:细胞数≥106,冻存细胞从液氮罐中,37℃水浴复苏,融化后离心收集细胞沉淀,尽可能去除冻存液,否则会影响DNA抽提质量;

5. 样本寄送:应在送样包裹中放置冰袋或干冰,建议顺丰快递;

6. 为了保证DNA抽提质量,确保细胞在消化或冻存前,细胞状态良好,处于生长对数期;

不建议以细胞悬液或细胞培养瓶形式寄送样本

 

 

细胞STR鉴定样本收集步骤参考

 

收集悬浮细胞沉淀步骤:

1.将细胞悬液转移至离心管中

2. 200X g,离心10min,收集细胞

3. 移除上清液,用PBS清洗细胞沉淀1-2

4. 最后200X g,离心10min,收集细胞沉淀

 

收集贴壁细胞沉淀步骤:

1.移除细胞培养基。

2.沿着培养皿壁缓慢加入PBS(无钙镁离子),勿将细胞冲离培养皿,温和晃动培养皿,清洗细胞表面。

3.移除PBS

4.加入细胞消化液(如胰蛋白酶等),使消化液能覆盖所有细胞。在37℃孵育2-3min,温和晃动培养皿知道细胞开始剥离培养皿。

5.加入培养基终止消化,温和重悬细胞

6.200X g,离心10min,收集细胞

7.移除上清液,用PBS清洗细胞沉淀1-2

8.最后200X g,离心10min,收集细胞沉淀

 

支原体检测样本制备:建议送检上清

1.贴壁细胞上清液或细胞沉淀制备

贴壁细胞上清制备:在无抗生素及其它抑菌或灭菌物质条件下培养 3 天,汇合度达到90% 左右时,直接吸  1.0ml 细胞培养上清液移至  1.5ml 离心管中

贴壁细胞沉淀制备上述(a贴壁细胞收取完上清后,加入1ml PBS,使用细胞刮刮取细胞,吸取转移至1.5ml离心管,12000rpm离心沉淀细胞。(如果使用胰酶消化细胞,需要10ml PBS洗三遍后,1ml PBS重悬沉淀,然后转移至1.5ml离心管,12000rpm离心获得细胞沉淀。)

2.悬浮细胞上清液或细胞沉淀制备

悬浮细胞上清制备:在无抗生素及其它抑菌或灭菌物质条件下培养 3 天,500g离心5min,直接吸  1.0ml 细胞培养上清液移至  2ml 离心管中

悬浮细胞沉淀制备上述(c吸取上清液后的沉淀,加入1ml PBS重悬沉淀,然后转移至1.5ml离心管,12000rpm离心10min,弃上清,获得细胞沉淀。

 







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