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猪皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒

猪皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒

型    号: 48T/96T
报    价: 2800
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猪皮质醇(Cortisol)酶联免疫分析(ELISA)
本公司主营试剂,原装试剂,sigma ,自营品牌试剂,生化对照品,植物对照品,中药对照品、进口标准品。价格实惠,质量有保证,我们始终秉承“质优价廉,服务顾客"的原则,以优质的产品、最周到的服务,期待与您的合作!

48T/96T猪皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒的详细资料:

猪皮质醇(Cortisol)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

药品名称:

通用名:猪皮质醇(Cortisol)酶联免疫诊断试剂盒

使用目的:

本试剂盒用于测定猪血清、血浆、或其它相关组织液中皮质醇(Cortisol)含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪皮质醇(Cortisol)水平。用纯化的猪皮质醇(Cortisol)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入猪皮质醇(Cortisol)抗原,再与HRP标记的皮质醇(Cortisol)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的皮质醇(Cortisol)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中猪皮质醇(Cortisol)浓度。

试剂盒组成

 

1

20倍浓缩洗涤液

30ml×1

7

终止液

6ml×1

2

酶标试剂

6ml×1

8

标准品(90μg/L

0.5ml×1

3

酶标包被板

12孔×8

9

标准品稀释液

1.5ml×1

4

样品稀释液

6ml×1

10

说明书

1

5

显色剂A

6ml×1

11

封板膜

2 

6

显色剂B

6ml×1/

12

密封袋

1

标本要求

1.标本采集后尽早进行实验。

2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

3.可将标本放于-20保存,但应避免反复冻融。

操作步骤

1.         标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为60μg/L40μg/L 20μg/L10μg/L5μg/L)。

2.         加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品稀释度为5倍)。加样时将样品加于酶标板孔底部,轻轻晃动混匀。

3.         温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  

4.         配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用

5.         洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.         加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.         温育:操作同3

8.         洗涤:操作同5

9.         显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

10.     终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.     测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

 计算

  以标准物的浓度为横坐标,其OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

注意事项

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.  请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5.  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准

7.底物请避光保存。

8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

检测范围:

3μg/L -70μg/L

规格:

96人份/

保存条件及有效期

1.试剂盒保存:2-8

2.有效期:6个月

 

 


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