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胰岛素ELISA试剂盒的操作步骤说明
点击次数:349 发布时间:2018-12-27
  操作步骤:
  1.标准品的稀释:胰岛素ELISA试剂盒提供原倍标准品一支,用户可在小试管中进行稀释。
  2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50/l,待测样品孔中先加样品稀释液 40/l, 然后再加待测样品10/l(样品zui终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
  3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
  4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
  5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。
  6.加酶:每孔加入酶标试剂 50/l,空白孔除外。
  7.温育:操作同 3。
  8.洗涤:操作同 5。
  9.显色:每孔先加入显色剂 A50?l,再加入显色剂 B50?l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色 15 分钟。
  10.终止:每孔加终止液 50/l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
  11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
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